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1:
[发明]
制备转基因哺乳动物的PAMAM-D介导的精子载体法
申请号:
200710057002.4
公开号:CN101275148 主分类号:C12N15/85(2006.01)I
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2007.03.27 公开日:2008.10.01
发明人:
王广有
;
杨惠祥
;
乔宝民
;
刘春雨
;
李胜芝
;
张 玥
;
马腾骧
摘要:一种培育转基因哺乳动物的PAMAM-D介导的精子载体法,包括以下步骤:外源基因酶切呈末端粘性的线性构型,针对不同精子确定其用量范围;在合成代数大于G5及其与外源DNA电荷比2~50∶1的范围内对PAMAM-D进行筛选,以外源DNA转染精子效率高又能保持精子活力的外源DNA用量与PAMAM-D代数和剂量为最佳组合条件,以此制取PAMAM-D/外源DNA复合物;在对洗涤后上清液IF-1监测下,充分洗涤采集的精子;采用共孵育法使复合物体外转染精子,经分选提取单一转染外源DNA的精子,或以睾丸内注射形成转染外源DNA的精子,经体外授精胚胎移植、体内人工授精及自然交配使雌性动物受孕,培育转基因动物。
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2:
[发明]
人类多基因疾病关键基因的无向网络筛选方法
申请号:
201010170331.1
公开号:CN102086473A 主分类号:C12Q1/68(2006.01)I
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2010.05.12 公开日:2011.06.08
发明人:
杨阔
;
徐勇
;
韩瑞发
;
张志宏
;
刘妍
;
张琚
;
郁春燕
;
王刚
摘要:本发明公开了一种人类多基因疾病关键基因的无向网络筛选方法,本发明通过人类疾病基因表达谱数据收集、差异表达基因的基因功能注释,根据基因之间的功能,从一个差异表达基因A出发,连线链接下一个基因B,再由基因B出发连接与其关系密切的基因C,以此类推,同时查找另外的差异表达基因D和基因E的功能,并用连线链接,获得整个疾病基因的相互作用网络;每个基因作为一个节点,用数字序号代表,而每两个基因联系的信号通路连线构成了网络的边,从而构建基因相互作用无向网络模型;经节点收缩后网络凝聚度的评估,并根据节点重要度进行排序,选取相应的基因作为人类多基因疾病关键基因。
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3:
[发明]
人前列腺癌新鲜组织激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型的构建方法
申请号:
201310170295.2
公开号:CN103210879A 主分类号:A01K67/027(2006.01)I
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2013.05.10 公开日:2013.07.24
发明人:
牛远杰
;
蒋宁
;
尚芝群
;
田晶
;
陈靖
;
朱识淼
;
马媛
;
张名浩
;
孙李斌
摘要:本发明公开了一种人前列腺癌新鲜组织激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型的构建方法。其是在小鼠皮下埋藏含10mg睾酮缓释胶囊一周,另将人前列腺癌新鲜组织培养的原代细胞与人工基膜混合后,接种于补充雄激素的BULB/C裸鼠单侧肾被膜下,传代于该系鼠的前列腺前叶,得到人激素依赖性前列腺癌裸鼠模型,待裸鼠肿瘤生长>50mm3进行去势,将肿瘤传代给手术去势及不补充雄激素的裸鼠,肿瘤长大后经传代得到人前列腺癌新鲜组织激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型。这样使本发明更接近于人体前列腺癌,以裸鼠异体种植人前列腺癌新鲜组织技术和原代细胞培养技术为平台,同时得到具有同一人前列腺癌组织来源的激素依赖和非依赖的前列腺癌裸鼠模型。
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4:
[发明]
一种E2F3基因沉默对前列腺癌动物模型中全血E2F3影响的方法
申请号:
201410334972.4
公开号:CN104131088A 主分类号:
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2014.07.14 公开日:2014.11.05
发明人:
胡海龙
;
孙岩
;
陈涛
;
谢林国
摘要:本发明公开了一种E2F3基因沉默对前列腺癌动物模型中全血E2F3影响的方法,通过免疫组化研究不同前列腺癌组织中E2F3的表达情况,明确E2F3与前列腺癌分级、分期及预后的关系;通过构建针对E2F3的AAV病毒载体,沉默E2F3基因并进行相关的外功能实验;通过建立裸鼠前列腺癌模型,成功应用AAV病毒载体进行体内实验并明确E2F3基因沉默前后裸鼠全血中E2F3mRNA表达情况。本发明的E2F3基因作为前列腺癌基因治疗的高效靶点,为后续的以E2F3为靶点的前列腺癌基因治疗体内实验奠定基础;针对E2F3的重组RNA干扰AAV病毒能够抑制肿瘤细胞的增殖并能够促进细胞的凋亡,并有效抑制动物模型肿瘤的生长并降低了外周血标本内E2F3的表达,为以E2F3为靶点的肿瘤基因沉默疗法提供了可靠的理论和实验基础。
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5:
[发明]
神经降压素在诊断去势抵抗性前列腺癌神经内分泌化亚型和判断预后中的应用
申请号:
201410522712.X
公开号:CN104237535A 主分类号:
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2014.09.30 公开日:2014.12.24
发明人:
牛远杰
;
尚芝群
;
朱识淼
;
蒋宁
;
田昊
;
孙李斌
;
李星
摘要:本发明公开了神经降压素在制备诊断去势抵抗性前列腺癌神经内分泌化亚型试剂中的应用。测定受试者血清中神经降压素水平,将其与受试者临床数据进行相关性分析,同时利用基础生物学实验验证,证明神经降压素与去势抵抗性前列腺癌神经内分泌化亚型具有强相关性。本发明为临床上诊断去势抵抗性前列腺癌神经内分泌化亚型和判断其预后提供了新的方法。
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6:
[发明]
尿液中exosome源性miRNAs生物标记物的检测方法
申请号:
201510664323.5
公开号:CN105368931A 主分类号:
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2015.10.15 公开日:2016.03.02
发明人:
王爱香
;
徐勇
;
畅继武
;
刘昆
;
刘春雨
;
冯士楼
;
赵津辉
;
李玉皓
摘要:本发明公开了一种尿液中exosome源性miRNAs生物标记物的检测方法,属于分离、制备或纯化DNA或RNA的方法领域。本发明从人尿液中提取exosome小体,通过电镜与Western blot对其进行形态学及蛋白鉴定,通过NanoSight LM10对其进行大小分布分析;鉴定分析后从中提取包含miRNAs的total RNA,冷冻干燥法对total RNA进行纯化分析,然后进行反转录及荧光定量PCR扩增,分离鉴定出所需的miRNAs生物标记物。本发明以尿液为实验材料,不仅收集简便、无创、数量大,而且其内含有大量的exosome,为鉴定miRNAs生物标记物提供了物质基础,具有广阔的应用前景。
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7:
[发明]
用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒及使用方法
申请号:
201610770860.2
公开号:CN106198985A 主分类号:G01N33/574(2006.01)I
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2016.08.31 公开日:2016.12.07
发明人:
王嘉南
;
王林
;
杨阔
;
马鹏德
;
杜娥
;
刘通
;
丁浩
;
陈赛鹏
;
徐勇
摘要:本发明公开了一种用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒及使用方法,涉及免疫测定法。本发明所述试剂盒包括FGγ抗体,并通过双抗体夹心ELISA法检测血清中的FGγ含量,进一步判断患者是否已进展为去势抵抗性前列腺癌。本发明有效的解决了现有技术中检测去势抵抗性前列腺癌的产品或方法特异性差、准确性不高的问题。本发明试剂盒根据血清中FGγ的含量来诊断去势抵抗性前列腺癌,具有较高的灵敏度和特异度。本发明试剂盒操作简单快速、合理可行,可提高去势抵抗性前列腺癌的诊断效率,具有广阔的应用前景。
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8:
[发明]
用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒及使用方法
申请号:
201610770861.7
公开号:CN106290919A 主分类号:G01N33/68(2006.01)I
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2016.08.31 公开日:2017.01.04
发明人:
杨阔
;
马鹏德
;
杜娥
;
刘通
;
王嘉南
;
王林
;
丁浩
;
陈赛鹏
;
徐勇
摘要:本发明公开了一种用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒及使用方法,涉及免疫测定法。本发明所述试剂盒包括ACTG1抗体,并通过双抗体夹心ELISA法检测血清中的ACTG1含量,进一步判断患者是否已进展为去势抵抗性前列腺癌。本发明有效的解决了现有技术中检测去势抵抗性前列腺癌的产品或方法特异性差、准确性不高的问题。本发明试剂盒根据血清中ACTG1的含量来诊断去势抵抗性前列腺癌,具有较高的灵敏度和特异度。本发明试剂盒操作简单快速、合理可行,可提高去势抵抗性前列腺癌的诊断效率,具有广阔的应用前景。
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9:
[发明]
用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒及使用方法
申请号:
201610770859.X
公开号:CN106405085A 主分类号:G01N33/574(2006.01)I
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2016.08.31 公开日:2017.02.15
发明人:
杜娥
;
刘通
;
王嘉南
;
王林
;
杨阔
;
马鹏德
;
丁浩
;
陈赛鹏
;
徐勇
摘要:本发明公开了一种用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒及使用方法,涉及免疫测定法。本发明所述试剂盒包括β‑actin抗体,并通过双抗体夹心ELISA法检测血清中的β‑actin含量,进一步判断患者是否已进展为去势抵抗性前列腺癌。本发明有效的解决了现有技术中检测去势抵抗性前列腺癌的产品或方法特异性差、准确性不高的问题。本发明试剂盒根据血清中β‑actin的含量来诊断去势抵抗性前列腺癌,具有较高的灵敏度和特异度。本发明试剂盒操作简单快速、合理可行,可提高去势抵抗性前列腺癌的诊断效率,具有广阔的应用前景。
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10:
[发明]
AR-V7可变剪切序列在抗去势抵抗性肿瘤中的应用
申请号:
201810769808.4
公开号:CN108866052A 主分类号:C12N15/11(2006.01)I
申请人:
天津市泌尿外科研究所
申请日:2018.07.13 公开日:2018.11.23
发明人:
牛远杰
;
尚芝群
;
于健鹏
;
冯睿
摘要:本发明公开了AR‑V7可变剪切序列在抗去势抵抗性肿瘤中的应用,具体的可变剪切序列如SEQ ID NO.7所示;本发明同时公开了CYTOR可以调控AR‑V7的表达,提示CYTOR可以用于治疗雄激素受体相关肿瘤的激素去势治疗后的去势抵抗和复发转移;本发明同时公开了可以调控AR‑V7表达的反义寡核苷酸,为肿瘤的治疗,尤其是雄激素受体相关肿瘤的激素去势治疗后的去势抵抗和复发转移提供了新的治疗途径。
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