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1:
[发明]
一种手性β-羟基酯类化合物的酶催化合成方法
申请号:
201210070084.7
公开号:CN102634546A 主分类号:C12P7/62(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.03.16 公开日:2012.08.15
发明人:
朱惠霖
;
李斌
;
鞠鑫
;
王海艳
摘要:本发明涉及一种手性β-羟基酯类化合物的酶催化合成方法,合成路线如式(1)所示。通过使化合物i与化合物ii在0℃~室温、吡啶做缚酸剂的条件下反应,所得产物经萃取浓缩后再在R2OH中回流,然后重结晶得化合物iii;再将化合物iii、酮还原酶以及辅酶一起加入pH=6~8的磷酸缓冲液中,15~40℃下反应2~24小时,得到本发明的手性β-羟基酯类化合物iv。本发明采用酶催化合成方法制得手性β-羟基酯类化合物,无需使用昂贵的手性试剂,具有生产工艺条件温和、原料易得、转化率高、生产成本低等诸多优点,宜于大规模工业化生产。
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2:
[发明]
一种卤醇脱卤酶的生产方法
申请号:
201210072332.1
公开号:CN102634502A 主分类号:C12N9/88(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.03.19 公开日:2012.08.15
发明人:
谢磊
;
郑飞剑
;
张秀兰
;
李斌
摘要:本发明涉及一种卤醇脱卤酶的生产方法,是利用微生物发酵生产卤醇脱卤酶,通过优化发酵工艺和发酵培养基,提高卤醇脱卤酶的产量和活性。本发明利用的基因工程菌为表达了卤醇脱卤酶的重组大肠杆菌,发酵培养基的组成包括:酵母粉9~15g/L、甘油4.5~7.5g/L、NaCl8~11g/L、NaNO31~2g/L,KH2PO42~3g/L,K2HPO412~13g/L,微量元素2~5mg/L;所述微量元素包括CoCl2·6H2O、MnCl2·4H2O、CuCl2·4H2O和生物素等。本发明能够显著地提高卤醇脱卤酶的产量,酶活性可提高至900U/ml。
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3:
[发明]
一种氧化型辅酶I的制备方法
申请号:
201210056231.5
公开号:CN102605026A 主分类号:C12P19/32(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.03.06 公开日:2012.07.25
发明人:
陶军华
;
李斌
;
鞠鑫
;
梁晓亮
;
庄季昌
摘要:本发明涉及一种氧化型辅酶I的制备方法,该方法使烟酰胺核苷(NR)和三磷酸腺苷二钠盐(ATP-Na2)在pH为5.0~8.0的缓冲溶液中,在烟酰胺核苷激酶(NRK)的催化作用下以及二价金属离子存在下,在温度30℃~40℃下反应得到氧化型辅酶I(NAD+)。本发明采用生物催化的方法,利用烟酰胺核苷激酶一锅法制备氧化型辅酶,反应体系简单,条件温和,具备良好的产业化应用前景。
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4:
[发明]
一种氧化型辅酶II的酶催化制备方法
申请号:
201210056233.4
公开号:CN102605027A 主分类号:C12P19/36(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.03.06 公开日:2012.07.25
发明人:
陶军华
;
李斌
;
谢磊
;
庄季昌
;
周永达
;
张超
;
刘根
摘要:本发明涉及一种氧化型辅酶II的酶催化制备方法,其以烟酰胺核苷(NR)和三磷酸腺苷二钠盐(ATP-Na2)为原料,使它们在烟酰胺核苷激酶(NRK)、无机焦磷酸酶、NAD激酶及多聚焦磷酸激酶四种酶存在下,在pH为4.0~8.5的缓冲溶液中,以及温度10℃~40℃下进行一锅煮反应得到氧化型辅酶II。本发明解决了目前酶催化制备方法中烟酰胺核苷磷酸成本高且不易得到,反应时间长,工艺成本较高,工艺条件也不适合工业放大的技术难题,能够高效,低成本,且易于工业化放大生产的获得氧化型辅酶II。
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5:
[发明]
一种葡萄糖脱氢酶的生产方法
申请号:
201210065718.X
公开号:CN102604904A 主分类号:C12N9/04(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.03.14 公开日:2012.07.25
发明人:
陈令伟
;
周强强
;
武涛
;
刘毅
摘要:本发明涉及一种葡萄糖脱氢酶的生产方法,主要是采用了微生物发酵方面的流加补料技术,利用基因工程菌发酵生产葡萄糖脱氢酶。具体过程是:在37℃的培养温度下,培养含有葡萄糖脱氢酶基因的重组大肠杆菌,从而表达葡萄糖脱氢酶;然后将所述重组大肠杆菌接种至培养基进行发酵,发酵过程中通过流加补料技术向包含所述重组大肠杆菌的发酵液中添加补料培养基,并使流加速度随着发酵时间的延长而梯度递增;当菌体初始生长阶段结束后,加入诱导剂,将温度由37℃降至约28℃后保持恒温,至发酵结束。本发明方法使发酵过程中的发酵条件尽可能与菌体实际需要相适应,可以使菌体密度达到高值,提高葡萄糖脱氢酶的产量,具有极好的产业应用价值。
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6:
[发明]
一种L-2-氨基丁酸的生物制备方法
申请号:
201210066624.4
公开号:CN102605014A 主分类号:C12P13/04(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.03.14 公开日:2012.07.25
发明人:
李斌
;
王海艳
;
鞠鑫
摘要:本发明涉及一种L-2-氨基丁酸的生物制备方法,其以L-苏氨酸为原料,使L-苏氨酸在水中、在L-苏氨酸脱氨酶和具有亮氨酸脱氢酶和辅酶再生功能的全细胞的催化作用下,在温度15℃~50℃下搅拌反应得到L-2-氨基丁酸。本发明方法以水代替缓冲盐溶液构成水相反应体系,原料成本降低;用于催化的苏氨酸脱氨酶和全细胞均可由微生物发酵大规模生产,成本低,来源广;生物酶促催化反应为水相反应,酶法转化条件温和,原料转化彻底,后处理简单,采取等电点结晶与薄膜蒸发分离技术相结合的方法分离产物,同时回收水和甲酸铵,成本低,无废水废渣,工艺环保,适于产业化生产L-2-氨基丁酸。
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7:
[发明]
一种(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的生物制备方法
申请号:
201210069347.2
公开号:CN102605011A 主分类号:C12P7/62(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.03.16 公开日:2012.07.25
发明人:
陶军华
;
鞠鑫
;
唐圆圆
;
李斌
摘要:本发明涉及一种(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的生物制备方法,其以4-氯-3-羰基丁酸乙酯为底物,使该底物在生物催化剂和氢供体的存在下发生不对称还原反应生成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,特别是,所述生物催化剂为酮还原酶KRED102,所述氢供体为异丙醇,所述不对称还原反应在pH为5.0~9.0的水相缓冲液中进行,并且反应体系中添加有聚乙二醇400作为底物分散剂以及二价金属离子作为酶活力增强剂。本发明方法通过添加廉价且来源广泛的辅料,有效地改进了传统酶催化生产过程中底物浓度低、酶反应耗时长等缺点,且操作简单,特别适合在制药工业中推广应用。
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8:
[发明]
一种空气杀菌装置
申请号:
201210371506.4
公开号:CN102836456A 主分类号:A61L9/16(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.09.28 公开日:2012.12.26
发明人:
候茂奇
;
葛玲玲
摘要:本发明涉及一种空气杀菌装置,其包括蒸汽筒、筒架、设置在蒸汽筒内且沿蒸汽筒的高度方向延伸的空气盘管、分别与空气盘管的下端部和上端部相连通的空气入管和空气出管、连接在蒸汽筒的下侧部用于供蒸汽进入的蒸汽入管、连接在蒸汽筒的上侧部供蒸汽排出的蒸汽出管。本发明的空气杀菌装置,在空气自空气入管经过盘管向上流动的过程中,在蒸汽筒内高温蒸汽作用下,实现杀菌,杀菌效果好;此外,本发明结构简单,成本低。
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9:
[发明]
6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯的生物制备方法
申请号:
201210466628.1
公开号:CN102978249A 主分类号:C12P13/00(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.11.19 公开日:2013.03.20
发明人:
鞠鑫
;
乐庸堂
摘要:一种6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯的生物制备方法,其以6-氰基-(5R)-羟基-3-氧代己酸叔丁酯为底物,该底物在生物催化剂、辅因子和氢供体的存在下发生还原反应生成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯,所述的生物催化剂为重组酮还原酶,所述的辅因子为NAD/NADH或NADP/NADPH,所述的氢供体为异丙醇,所述的还原反应在pH为6.5~7.5的水相缓冲液中进行。本发明方法只需要一种重组酮还原酶即可同时完成底物还原和辅酶再生循环,大大降低了生产成本,且反应条件温和,常温、常压、水相条件下即可进行,无需使用危险试剂。反应中产生的副产物丙酮易挥发,很容易从反应体系中除去,大大简化了后处理工作。
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10:
[发明]
一种L-叔亮氨酸的生产方法
申请号:
201210508084.0
公开号:CN102978251A 主分类号:C12P13/04(2006.01)I
申请人:
苏州汉酶生物技术有限公司
申请日:2012.12.03 公开日:2013.03.20
发明人:
王海艳
;
鞠鑫
;
李斌
;
唐圆圆
;
张超
摘要:本发明涉及生物制药和生物化工领域,具体涉及一种L-叔亮氨酸的生产方法,所述方法由L-亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶酶法合成L-叔亮氨酸。酶催化步骤中酶投料量为底物的4%(w/w),辅酶投料量为底物的0.2%(w/w),时空产率为100g/d/L,产品纯度>98%,光学纯度>99%。本发明与传统的制备工艺相比,有效减少了催化剂酶的用量,产品纯度高、产率高,工艺流程简单,对设备无特殊要求,适用于工业化生产,产品可广泛应用于化工中间体和医药中间体。
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