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发明专利:121实用新型: 34外观设计: 12
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申请号:200510079754.1 公开号:CN1718738 主分类号:C12P19/34(2006.01)I
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2005.06.28 公开日:2006.01.11
发明人:曾润颖;赵 晶
摘要:本发明提供一种从海洋沉积物中同时提取微生物宏基因组DNA和总RNA的方法,包括将海洋沉积物用变性溶液处理,加入沙子振荡,加入蛋白酶和溶菌酶进行裂解,再加入SDS和PVPP溶液进行进一步裂解,加入萃取剂进行处理,萃取液用异丙醇沉淀,最后用核酸吸附树脂进行纯化。该方法特别适用于从海洋沉积物中同时提取微生物宏基因组DNA和总RNA,同时也可应用于陆地土壤样品,陆地湖泊沉积物样品中微生物宏基因组DNA和总RNA的共提取。
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申请号:200510081630.7 公开号:CN1884479 主分类号:C12N1/20(2006.01)I
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2005.06.23 公开日:2006.12.27
发明人:曾润颖;林 昱
摘要:一种抗艾滋病病毒I型的化合物制备方法,涉及一种细菌及其制备的化合物,尤其是涉及一种假交替单胞菌属及其制备的抗艾滋病病毒I型化合物。提供一种可制备抗艾滋病病毒I型的化合物的深海菌株。深海菌株为假交替单胞菌属101X(Pseudoalteromonas sp.101X),保藏编号为CCTCC NO:M205039。将菌株101X用无机盐培养基活化后转接于培养基,培养至指数生长期,得发酵液;将发酵液离心,弃沉淀,上清液备用;在上清液中加入乙酸乙酯萃取,收集水相,量取大孔吸附树脂,清洗、活化后装柱,将水相溶液上柱,用纯水洗柱后抽干,用甲醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩去除甲醇,经真空冷冻干燥,得化合物。
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申请号:201310268933.4 公开号:CN103436511A 主分类号:C12N9/52(2006.01)I
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2013.06.28 公开日:2013.12.11
发明人:曾润颖;徐辉
摘要:一种高温碱性蛋白酶及其制备方法,涉及蛋白酶。提供一种高温碱性蛋白酶Fppro1及制备方法,以及高温碱性蛋白酶基因Fppro1。高温碱性蛋白酶Fppro1的生产菌株为太平洋火色杆菌Flammeovirga?Pacifica?H2。制备时,克隆高温碱性蛋白酶基因Fppro1,将其插入表达载体,构建携带高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体;将高温碱性蛋白酶基因Fppro1的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,选取阳性克隆于培养基中培养;离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞,重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中,将裂解后的悬液离心,收集上清液,再与Ni-NTA?Agarose混匀,纯化。
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申请号:200510062600.1 公开号:CN1670187 主分类号:C12N1/20
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2005.03.28 公开日:2005.09.21
发明人:曾润颖;林念炜
摘要:一种碱性低温蛋白酶及其制备方法,涉及一种细菌和从细菌得到的蛋白酶。提供一种从南极深海泥样获得并经分离成为纯培养物的菌株海杆菌属R2、从R2菌株得到的碱性低温蛋白酶及其制备方法。保藏编号为CCTCCNO:M205002。其步骤为粗酶液制备:将菌株R2活化后接于培养基,培养至指数生长期,再转接于培养基中,加氨苄青霉素和天冬酰胺,培养,发酵,离心;粗酶液加硫酸铵离心取上清,离心取沉淀,在缓冲液中透析;酶液离心,冷冻干燥,再上样洗脱,收集酶活性部分冷冻干燥;重溶于缓冲液中并透析,上样洗脱,合并活性部分,冷冻干燥;样品溶于缓冲液中并透析分离纯化,收集有活力部分冷冻干燥,即为纯酶。
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申请号:200910111325.6 公开号:CN101514347 主分类号:C12N15/63(2006.01)I
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2009.03.20 公开日:2009.08.26
发明人:曾润颖;陈兴麟
摘要:具氨苄青霉素抗性的质粒T5与DNA序列及构建方法,涉及一种具有氨苄青霉素抗性的质粒T5。提供一种来源于深海的具氨苄青霉素抗性的质粒T5与DNA序列及其构建方法。质粒来源于海底沉积物,将质粒转化至大肠杆菌感受态细胞中,可使该细胞具有抗氨苄青霉素的特性;质粒T5能在各种E.coli细胞中稳定增殖,可采用常规的质粒提取技术获得。构建时,提取深海沉积物样品宏基因组DNA,不完全酶切,检测,对1-5kb片段回收;使酶切后的DNA片段自连;将连接后的DNA片段转化至感受态细胞中,筛选,挑取长出的单菌落,提取质粒,并验证;以质粒做模板,设计引物进行PCR扩增,得质粒的部分序列,反向测序,得全序列。
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申请号:201110054640.7 公开号:CN102181385A 主分类号:C12N1/20(2006.01)I
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2011.03.04 公开日:2011.09.14
摘要:甲醛生物降解剂及其制备方法,涉及一种生物降解剂。提供一株假单胞菌IOFA1,以及甲醛生物降解剂及其制备方法。所述甲醛生物降解剂为假单胞菌IOFA1菌体破碎液干粉。所述甲醛生物降解剂的主要成分为甲醛脱氢酶。所述制备方法为:将假单胞菌IOFA1用培养基进行活化后,接种于培养基中,振荡培养;在培养基中加入甲醛溶液继续振荡培养;将培养液在4℃温度下离心,去除上清液,收集菌体;在菌体中加入100mL无菌水,悬浮起菌体,收集悬浮液;将悬浮液中的菌体破碎后离心,去除沉淀,将上清液过滤除菌,并冷冻干燥,即得假单胞菌IOFA1菌体破碎液干粉,再经纯化,即得甲醛生物降解剂。
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申请号:201210347105.5 公开号:CN102827899A 主分类号:C12P19/14(2006.01)I
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2012.09.18 公开日:2012.12.19
摘要:一种龙须菜琼胶寡糖及其制备方法与应用,涉及一种寡糖。提供一种龙须菜琼胶寡糖及其制备方法与龙须菜琼胶寡糖在制备抗氧化、抗紫外线保健品和化妆品中的应用。所述龙须菜琼胶寡糖是利用太平洋火色杆菌H2与龙须菜共培养,利用菌株所产的酶系直接降解龙须菜获得聚合度为4~8的琼胶寡糖,具有抗氧化、吸收紫外线等生理活性。制备时将菌株用活化培养基平板进行活化后,接种于种子培养基中,振荡培养得发酵液,再接种入产糖培养基中,继续振荡发酵培养后离心,收集上清液,采用膜过滤设备,将上清液依次用0.45μm,0.22μm滤膜,10000~50000D超滤膜和300~600D纳滤膜,所得滤出液即为龙须菜琼胶寡糖。
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申请号:201310026030.5 公开号:CN103114056A 主分类号:C12N1/20(2006.01)I
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2013.01.23 公开日:2013.05.22
摘要:一种醛脱氢酶及其制备方法,涉及一种醛脱氢酶。所述醛脱氢酶Fwaldh的生产菌株为太平洋火色杆菌H2。克隆所述醛脱氢酶基因fwaldh;将所述醛脱氢酶基因fwaldh插入表达载体,构建携带所述醛脱氢酶基因fwaldh的重组表达载体;将所述重组表达载体转化到E.coli?BL21中;选取转化后E.coli?BL21中的阳性克隆于培养基中进行发酵培养;离心收集发酵后的E.coli?BL21细胞,重悬所述E.coli?BL21细胞于裂解缓冲液中进行裂解;将裂解后的悬液进行离心,收集上清液;将上清液与Ni-NTA?Agarose混匀,按照纯化试剂盒说明书进行纯化,得所述醛脱氢酶Fwaldh。
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申请号:201410833881.5 公开号:CN104560914A 主分类号:
申请人:国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2014.12.29 公开日:2015.04.29
摘要:一种α-淀粉酶Amy16及其基因和应用,涉及淀粉酶。所述α-淀粉酶Amy16分离自太平洋火色杆菌H2;α-淀粉酶Amy16的制备:1)克隆α-淀粉酶基因amy16,将α-淀粉酶基因amy16插入表达载体,构建携带α-淀粉酶基因amy16的重组表达载体;将α-淀粉酶基因amy16的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,选取转化后大肠杆菌BL21中的阳性克隆于培养基中进行发酵培养;离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞,重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中裂解,将裂解后的悬液离心,收集上清液;将所得上清液纯化,即得所述α-淀粉酶Amy16。所述α-淀粉酶Amy16可在制备淀粉降解剂中应用。
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申请号:201510894666.0 公开号:CN105533167A 主分类号:
申请人:福建省农业科学院中心实验室;国家海洋局第三海洋研究所 申请日:2015.12.08 公开日:2016.05.04
摘要:一种海藻寡糖鱼饲料添加剂,涉及一种海藻寡糖。针对现有技术的不足,提供能够提高饲料的利用率,促进生长,提高抗病能力,降低成本,同时能够提高鱼质量的一种海藻寡糖鱼饲料添加剂。所述海藻寡糖鱼饲料添加剂的海藻寡糖为龙须菜琼胶寡糖,是利用一株太平洋火色杆菌(Flammeovirga Pacifica)H2与龙须菜共培养,通过微生物所产的酶系直接降解龙须菜制备而得的4~8糖的混合物。所述太平洋火色杆菌(Flammeovirga Pacifica)H2保藏编号为CCTCC NO:M2012229。
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